تحقیق درمورد رنگ آمیزی گرم بافرمت ورد

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 3

رنگ‌آمیزی گرم

رنگ‌آمیزی گرم (به انگلیسی: Gram staining) یکی از مهم‌ترین ومتداولترین روش‌های رنگ آمیزی در میکروبیولوژی است که اولین بار توسط کریستین گرم ابداع شد. دراین رنگ آمیزی باکتری‌ها بر مبنای رنگ باکتری پس ازرنگ آمیزی به دودسته گرم مثبت و گرم منفی تقسیم می‌شوند. رنگ باکتری پس ازرنگ آمیزی به توانایی حفظ رنگ اول وبه عبارتی به ساختمان دیواره سلولی باکتری بستگی دارد. دررنگ آمیزی گرم باکتری‌های گرم مثبت پس ازرنگ آمیزی به رنگ بنفش وباکتری‌های گرم منفی به رنگ قرمز مشاهده می‌شود. گرچه هر دو گروه یعنی باکتری‌های گرم مثبت و منفی دارای دیواره می‌باشند ولی فرق بین این دو گروه مربوط به خواصی است که در ساختمان دیواره سلولی آنها وجود دارد. اساس ساختمان در دیواره سلولی باکتری‌های گرم مثبت یک لایه ضخیمی‌است از پپتیدوگلیکان*[۱]، ولی در باکتری‌های گرم منفی ضخامت آن به حداقل می‌رسد.

فهرست مندرجات

[نهفتن]

۱ روش رنگ‌آمیزی گرم

۲ کاربرد رنگ آمیزی گرم

۳ جستار وابسته

۴ منابع

۵ پانویس

روش رنگ‌آمیزی گرم

پیش از آغاز رنگ آمیزی نخست باید یک فروتی از محیط کشت خالص باکتری بر روی لام تهیّه کنیم، در ادامه مراحل رنگ آمیزی گرم به قرار زیر هستند:

نخست رنگ کریستال ویوله رابه مدت ۳۰ تا ۴۵ ثانیه برروی فروتی باکتری روی لام می ریزیم، درنتیجه همه باکتری‌ها به رنگ بنفش درخواهد درآمد.

پس از شستشوی فروتی با آب، رنگ کریستال ویوله را با افزودن لوگول به مدّت ۳۰ تا ۴۵ ثانیه تثبیت می کنیم. لوگل باکریستال ویوله ترکیب شده وایجاد کمپلکس‌هایی می‌نمایید که باعث تثبیت رنگ کریستال ویوله درداخل دیواره سلولی باکتری می‌شود. پس ازاین مرحله، همه باکتریها کماکان به رنگ بنفش مشاهده می‌شوند .

مرحله رنگ زدایی:

مهم‌ترین مرحله رنگ آمیزی است. دراین مرحله پس از شستشو لام با آب لام به مدت ۱۵ تا۲۰ ثانیه در معرض موادرنگ زدا مانند الکل استون قرار می‌گیرد سپس با آب مورد شستشو قرار می‌گیرد. درباکتریهای گرم منفی که دارای لایه‌های پپتیدو گلیکان محدود وغشای خارجی غنی از چربی هستند این حلال باعث حذف این لایه‌ها وغشا می‌گردد وباکتری رنگ مراحل قبل راازدست می‌دهد. ولی درباکتریهای گرم مثبت به علت ضخامت زیاد لایه ی پپتیدوگلیکانی وعدم وجود لیپید فراوان در غشا رنگ مرحله قبل ازغشا خارج نمی‌شود .درنتیجه پس ازاین مرحله باکتریهای گرم منفی بی رنگ ولی باکتریهای گرم مثبت کماکان بنفش باقی خواهند ماند .

در انتها سطح فروتی راباسافرانین یا فوشین (قرمز رنگ) به مدت ۳۰ تا ۴۵ ثانیه می‌پوشانیم سپس باآب شستشو داده و پس از خشک شدن بامیکروسکوپ مورد بررسی قرار میگیرد. دراین مرحله باکتری‌های بی رنگ (باکتری های گرم منفی) به رنگ قرمز درمی‌آیند وباکتری‌های بنفش (باکتری های گرم مثبت) بدون تغییر رنگ باقی می‌مانند .

کاربرد رنگ آمیزی گرم

از رنگ امیزی گرم به دو جهت استفاده می شود:

شناسایی جنس باکتری

آنتخاب آنتی بیوتیک مناسب (باکتری های گرم مثبت در مقایسه با باکتری های گرم منفی نسبت به پنی سیلین G حسّاسیت بیشتری دارند)

با این حال همه یباکتری ها را نمی توان با رنگ امیزی گرم مشاهده نمود. فهرستی از باکتری های مهم از نظر پزشکی که با رنگ امیزی گرم قابل مشاهده نیستند در جدول زیر امده است.

باکتری های مهم از نظر پزشکی که با رنگ آمیزی گرم قابل مشاهده نیستند

نام باکتری

علّت عدم مشاهده باکتری با روش گرم

روش رنگ آمیزی جایگزین

1

مایکوباکتریوم ها شامل مایکوباکتریوم توبرکلوزیس

وجود مقدار زیادی چربی در دیواره سلولی که از نفوذ رنگ جلوگیری می کند

رنگ‌آمیزی اسید فاست

2

ترپونما پالیدوم

نازکتر از آن است که دیده شود

میکروسکوپ زمینه تاریک یا آنتی بادی فلوئورسنت

3

مایکوپلاسما پنومونیه

نبود دیواره سلولی

روشی وجود ندارد

4

لژیونلا پنومونیه

عدم دریافت رنگ قرمز

طولانی نمودن مرحله افزودن سافرانین در رنگ آمیزی گرم

5

کلامیدیا از جمله کلامیدیا تراکوماتیس

وجود ارگانیسم های درون سلولی، کوچکی سلول

6

ریکتزیا

وجود ارگانیسم های درون سلولی، کوچکی سلول

رنگ آمیزی گیمسا یا سایر رنگ آمیزی های بافتی

جستار وابسته

رنگ‌آمیزی اسید فاست

منابع

میکروب شناسی پزشکی جاوتز

میکروبیولوژی عمومی؛ دکتر فریدون ملکزاده، انتشارات دانشگاه تهران.

‎

Haward Hughes Medical Institute- 1999 Holiday Lecture on science CD-ROM

تحقیق درمورد رنگ کاری چوب به دلایل مختلفی انجام می بافرمت ورد

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 24

رنگ کاری چوب

رنگ کاری چوب به دلایل مختلفی انجام می‌شود ، که مهمترین آنها عبارتند از: زیبایی ، پنهان شدن معایب ، قسمت‌های خراب و زشت ، جلوگیری از نفوذ حشرات موذی ، رطوبت ، حفاظت در مقابل صدمات و … .

برای رنگ آمیزی ، رنگ‌های مختلفی وجود دارند که بسته به نوع رنگ آمیزی انتخاب می‌شوند . برای مثال اگر چوبی که می‌خواهیم رنگ کنیم خوش نقش باشد و بخواهیم نقوش آن به چشم بیاید باید از رنگ‌های روشن که زیر آن دیده می‌شود استفاده کرد و اگر بخواهیم چوبی که نقوش جالبی ندارد و بتونه هم شده است را رنگ کنیم باید از رنگ‌هایی استفاده کنیم که سطح کار را طوری بپوشانند که زیر کار دیده نشود .

اگر در طبیعت رنگی وجود نداشت استحکام و قدرت بینایی انسان از بین می رفت و یکنواختی و کسالت ایجاد شده و از تماشای طبیعت لذتی نمی بردیم .

رنسانس در اواسط قرن پانزدهم باعث ایجاد تحولات بسیاری در عرصه پرسپکتیو رشته های مختلف معماری ، نقاشی ، علم مناظر و مزایا گردید . در گذشته به همهء‌افراد اجازه داده نمی شد تا وارد حرفه نقاشی شوند و فرد باید حتماً مراحل و مراتبی را طی می کرد تا بتواند به این حرفه وارد شود و ازمحضر اساتید بهره برد. یکی از آن سلسله مراتب مبحث آناتومی و دیگری مبحث رنگ است . بیشترین کاربرد رنگ در طبیعت قابل رؤیت نمودن اشیاء‌می باشد . وقتی دو شیء یا دو فرم هم رنگ یا دارای نهایت کنتراست یا دوشیء دارای حالت مکمل و یا دو شیء دارای رنگهای ملایم را کنار هم قرار می دهیم چیزی که از لحاظ بصری می بینیم یکسان نیست. اگر در مکانی از نهایت کنتراست هااستفاده شود در آن مکان اغتشاش بوجود می آید . اصولاً کنتراست های شدیدباعث ایجاد اغتشاش ذهنی می گردند و باید رابطی در جهت تعدیل و هماهنگی آنها وجود داشته باشد .

در امور گرافیکی بیشتر از فرم های هندسی بهره گرفته و فضاهای مثبت و منفی را مد نظر قرار می دهند . در چیدمان ومعماری داخلی منزل ، چون افراد از کار روزمره به خانه باز می گردند و نیاز به آرامش و تسکین خاطر دارند کاربرد رنگهای گرم و تند و فرمهای با برشهای تند و تیز باعث ایجاد آزار واذیت بصری و گرفتن آرامش از افراد می شوند . به عبارت دیگر در فضاهای داخل منزل و طراحی دکوراسیون داخلی باید سعی شود که از فرمهای تیز و خشن و رنگهای خیلی گرم به مقدار زیاد استفاده نشود. معمولاً برای چیدمان داخلی رنگ های ملایم واز نظر ارزشی زیر شصت درصد بکار برده می شود .

همان طورکه در جلسات قبل اشاره کردیم کاربرد رنگهای سرد احساس سرما و در خود فرو رفتن را به افراد القاء می کنند و کاربرد رنگهای گرم احساس وجد و هیجان را تشدید می کنند .

گاهی مشاهده می شودکه وقتی رنگهای سرد و گرم را درکنار هم قرار می دهیم این توازن و بالانس در دید بصری به خوبی مشاهده نمی شود . به همین دلیل برای از بین بردن فاصله و شکاف میان رنگهای گرم و سرد احتیاج به یک رابطی داریم تا احساس ملایم تری بوجود آید .

کارهایی که قبل از رنگ کاری باید انجام داد :

بتونه کاری:

ابتدا سطوح چوب را با انواع بتونه ، بتونه کاری می‌کنیم . انتخاب بتونه به نوع رنگی که استفاده می‌کنیم بستـگی دارد . با این کار تمام خـلـل و فرج و ترک‌های سطحی را پر می‌کند و سطحی صاف و هموار را بوجود می‌آورد .

سنباده زنی:

در این قسمت بتونه هایی که به چوب زده‌ایم را سنباده می‌زنیم تا به سطح چوب برسیم . هدف از این کار این است که فقط بر میان خلل و فرج و ترک‌ها و شیارها بتونه بماند و روی سطح بتونه‌ای باقی نماند ، چون باعث افزایش اندازه قطعه چوبی می‌شود .

رنگ زدن:

در این قسمت ، عمل اصلی که همان رنگ زدن است با انواع وسایل ( قلمو ، پارچه پرزدار و … ) انجام می‌شود . این قسمت مهمترین قسمت است که باید به دقت انجام شود. مثلاً نباید به یک قسمت آنقدر رنگ بزنیم که شرّه کند و در قسمتی کمتر رنگ بزنیم که زیر رنگ دیده شود . معمولاً رنگ را در دو نوع نوبت ( دو دست ) به قطعه چوب می‌زنند . دست اول برای رنگ‌آمیزی کلی کار و دست دوم نیز که به کل زده می‌شود کاستی‌های رنگ را در قسمت‌های مختلف برطرف می‌کند .

طبقه بندی رنگ‌ها

رنگهای خنثی:

این رابطها همان رنگهای خنثی هستند . رنگهای خنثی درست مثل یک پل، از زمستان به بهار یا از رنگهای گرم به رنگهای سرد عمل می کنند . رنگهای خنثی مثل رنگ خاکستری به محض اینکه در کنار رنگهای دیگر قرار می گیرند باعث ایجادوجد و هیجان می شوند . مثلاً وقتی رنگ خاکستری در کنار رنگ قرمز می آید باعث ایجاد هیجان می شود. اما این هیجان ایجاد شده به اندازه ء‌رنگ قرمز نیست بلکه تعدیل شده آن است .

به طور خلاصه رنگهای خنثی تعدیل کننده رنگهای گرم بوده و از شدت آنها می‌کاهند. همچنین این رنگها تعدیل کننده رنگهای سرد نیز بوده و ا زشدت سرما و بی حس و حالی آنها می کاهند . به عبارت دیگر رنگهای خنثی پلی هستند بین رنگهای سرد و گرم و هر زمانی که در کنار رنگهای دیگر قرار بگیرند باعث تعدیل آنها می شوند . رنگ های خاکستری خیلی سریع با تضاد های شدید و خشن خو گرفته و نیروی آنها را جذب می کنند. به طوری که این تضادها دیگر آن پختگی سابق راندارند و متعادل تر می شوند.

تحقیق درمورد رنگ آب فیروزه بافرمت ورد

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 6

رنگ آب فیروزهای :

فیروزه‌ای نام مجموعه‌ای از رنگ‌های بین طیف سبز و آبی است. در زبان انگلیسی بطور معمول برای آن نام cyan و در طراحی‌های گرافیکی و رایانه‌ای نام Aqua استفاده می‌شود.

روانشناسی :

اسرارآمیز و پند ناپذیر

دوستداران این رنگ اسرارآمیزند و احساساتی و کارهای شخصی خود را به خوبی اداره می کنند. پشتکار دارند و باثباتند و به نصایح دیگران در مورد کارهای خود کمتر توجه دارند. فیروزه ای معمولا رنگ مورد علاقه ی خانمها است.

فیروزه ای رنگ آرامش فکری و ذهنی است و با انسدادها و موانع حک شدن در خاطر و ذهن و روان مبارزه می کند. فیروزه ای به عنوان یک تقویت کننده عمل می کند و می تواند به تنظیم مجدد و ایجاد تعادل در روده کوچک و بزرگ کمک کند. فیروزه ای رنگی است که به پیشرفت و تسهیل رشد معنوی کمک شایان توجهی می کند.

رنگ فیروزه ای نماد جوانی است. اینرنگ اثر آرامش دهنده دارد. فیروزه ای رنگ ارتباط است. این رنگ ترکیبی از خصیصه رشدسبز و ویژگی ارتباط آبی می باشد. آبی فیروزه ای باعث سهولت ارتباط بین اشخاص درجایی که توسط این رنگ احاطه شده اند می شود.

فیروزه ای برای مدت طولانی در طلسمهاجهت حفاظت ، اطمینان نفس و قدرت به کار می رود.

به طور خلاصه اگر در زندگی تان به دنبال آرامش و آسودگی برای مقابله با آشفتگی و اضطراب؛ بازکردن جریان ارتباط ،گسترش پرسپکتیوتان و صلح هستید ، از رنگ آبی استفاده کنید.

خواص رنگ فیروزه ای: رنگ فیروزه ای در کاهش اضطراب، بیقراری و التهاب بافتی، عفونت های باکتریایی مفید است. این رنگ ساختار ایمنی بدن را تقویت می کند و لذا در درمان عفونت ها موثر است.

با پرتو رنگ فیروزه ای همراه با رنگ مکمل آن یعنی رنگ قرمز، می توان بیماری هایی مانند گلودرد، التهاب کلیه و مثانه، سرماخوردگی و سینوزیت را درمان کرد.

در طبیعت :

در اول سرد و در سوم خشک است.

افعال: این سنگ از فسفات آلومین به رنگ فیروزه ای غده ای شکل تشکیل میشود . ماده رنگی موجود در آن از مس و آهن است.بیشتر فیروزه ها در شکاف سنگ هایی یافت مشود که منابع غنی از آلومینیوم هستند.

تغییر رنگ در فیروزه در نتیجه تابش نور آفتاب، تبخیر آب طبیعی موجود در آن ، پاکی و کدورت هوا و برخورد چربی و مواد شیمایی با آن صورت می گیرد. به همین دلیل، بهتر است در هنگام شستن دستها، انگشتر فیروزه را از انگشت بیرون آورده شود . همچنین در حرارت 250 درجه سانتیگراد رنگ آبی آسمانی آن به رنگ سبز مات تبدیل میشود و جلا دادن سنگ فیروزه سبب پر رنگ تر شدن آن می شود.

فیروزه دارای خلل و فرج طبیعی است که آ نها را با تزریق مواد پلاستیکی می پوشانند و فیروزه با سخت تر می کند . هم چنین به دلیل خلل و فرج فراوان در توده فیروزه، برای خوش رنگ کردن آن از نمک های مس و آ نیلین استفاده می نمایند. همچنین کانی های زیادی وجود دارد که سبب شباهت با فیروزه آن ها را به جای فیروزه عرضه می کنند که از این میان می توان به کا لسدونی، هولیت رنگ کرده ، آمازونیت، کریسو کو لا و لازولیت اشاره کرد.

خواص: نگاه به فیروزه چشم را تقویت می کند. گذاشتن فیروزه بر روی چاکرای گلو برای درمان گلو درد، تقویت تارهای صوتی و درمان بیماریها ی دیوی و تنفسی موثر می نماید.

فیروزه قلب را تقویت می کند و سعه صدر می دهد. این سنگ، افسردگی های روحی و روانی و هم چنین ناراحتی های عصبی را درمان می کند و باعث آرامش می شود.

استفاده از انگشتر و یا گردنبدی از آن، برای دور کردن انرژی های منفی به ویژه چشم زخم و آثار آن مناسب است. این سنگ مانند عقیق، حرز بسیار مهمی در برابر حوادث و بلایا به شمار می رود و برای آسان شدن کارها و رونق در کسب و کار بسیار مفید می نماید.

همچنین گفته شده رنگ فیروزه هنگام بیماری صاحب این سنگ تغییر می کند و زمانی که حال او بهتر می شود رنگ آن به حالت اولیه بر می گردد.

فیروزه از نگاه دیگر:

این سنگ مخصوص قلب،گلو و چشم سوم است و از آن برای متعادل کردن همه بدن استفاده می شود . برای پاکسازی گلو مفید است و ریه را صاف و نرم می کند . ارتباط کلامی و نو شتاری را قدرت می بخشد. باراحتی عصبی را بر طرف می کند. سنگ فیروزه قدرت جلو گیری از حمله های روانی را دارد. اگر تکه ای فیروزه را در انگشتر یا گردنبد داشته راشید از شما در مقابل انرژی منفی و آلودگی محافظت می کند .

فیروزه شفا بخش معنوی ، روانی و فیزیکی است و به ما کمک می کند تا هنگام تجربه های معنوی به زمین متصل باشیم . فیروزه می تواند در کاهش درد های عضلانی و

تحقیق درباره رنگ آمیزی ساده با فرمت ورد

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 2

(رنگ آمیزی ساده)

چون پروتوپلاسم باکتری شفاف است و قابل تشخیص از محیط اطراف نیست، برای تشخیص و قرار دادن باکتری ها در گروه های مختلف، باکتری ها را رنگ می کنند. رنگ هایی که در میکروبیولوژی استفاده می شوند از مشتقات قطران زغال سنگ هستند.

انواع رنگ ها

الف) اسیدی (آنیونیک): رنگ های اسیدی دارای کروموژن منفی هستند یا آنیونیک اند و با قسمت هایی از سلول که دارای بار مثبت هستند ترکیب می شوند، مانند پروتئین ها. از این رنگ ها می توان به اسید پیریک، قرمز کنگو و فوشین اسیدی اشاره کرد.

ب) بازی (کاتیونیک): این رنگ ها دارای کروموژن مثبت هستند و با قسمت هایی از سلول که دارای بار منفی هستند ترکیب می شوند، مانند DNA و RNA. از این رنگ ها می توان به متیلن بلو، کریستال ویوله، سافرانین و تولوئیدن بلو اشاره کرد.

ج) خنثی (فاقد بار الکتریکی): این رنگ ها با قسمت هایی از سلول که فاقد بار هستند ترکیب می شوند، مانند رنگ سودان سیاه که برای رنگ آمیزی دانه های چربی مورد استفاده قرار می گیرد.

رنگ آمیزی ساده

در این رنگ آمیزی از یک رنگ برای مشاهدۀ شکل، آرایش و مرفولوژی سلول باکتری استفاده می شود که بر اساس تبادل بارهای مثبت و منفی و برقراری یک اتصال یونی بین مولکول ها عمل می کند. در این رنگ آمیزی ترجیحاً از رنگ های بازی استفاده می شود و چون سطح سلول باکتری هم به علت تجزیۀ گروه های کربوکسیل حاصل از تجزیۀ اسیدهای آمینه یا به علت تجزیۀ اسیدهای ریبونوکلوئیک در سیتوپلاسم دارای بار منفی تر است، در نتیجه بین بارهای + و – جاذبه ایجاد می شود و سطح سلول باکتری رنگ می شود.

مراحل رنگ آمیزی ساده

الف) تهیۀ گسترش (اسمیر): در تهیۀ گسترش یا از محیط مایع استفاده می کنیم یا از محیط جامد. اگر در تهیۀ گسترش از محیط جامد استفاده کردیم به آن یک قطره آب اضافه می کنیم.

طرز کار تهیۀ گسترش: اول با لوپ یک قطره آب روی لام می ریزیم بعد لوپ را روی شعله گرم می کنیم و بعد از آن صبر می کنیم تا لوپ سرد شود. بعد یک قطعه از کلنی بر می داریم و به قطره اضافه می کنیم و آنرا روی لام پهن می کنیم. باید توجه داشت که گسترش نباید ضخیم یا نازک باشد.

ب) خشک کردن: بعد از تهیۀ گسترش صبر می کنیم تا لام خشک شود.

ج) فیکس کردن (ثابت کردن): این عمل باعث می شود که پروتئین پروتوپلاسم باکتری منعقد شود و با شستن از روی لام شسته نشود. فیکس کردن با حرارت و مواد شیمیایی انجام می شود که در فیکس کردن با حرارت، لام را 3 تا 5 بار از داخل شعله عبور می دهیم.

د) ریختن رنگ: روی لام رنگ متیلن بلو می ریزیم و 3 تا 5 دقیقه صبر می کنیم و بعد لام را شست و شو می دهیم و خشک می کنیم.

بعد از این مراحل نمونه را زیر میکروسکوپ قرار می دهیم و با عدسی روغنی باکتری های رنگ شده را مشاهده می کنیم.

منابع

PMBOK 2008www.adinebook.com    جدید - کتاب راهنمای گستره دانش مدیریت پروژه ویرایش چهارم PMBOK 2008

تحقیق درباره رنگ آمیزی گرم با فرمت ورد

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 3

رنگ‌آمیزی گرم

رنگ‌آمیزی گرم (به انگلیسی: Gram staining) یکی از مهم‌ترین ومتداولترین روش‌های رنگ آمیزی در میکروبیولوژی است که اولین بار توسط کریستین گرم ابداع شد. دراین رنگ آمیزی باکتری‌ها بر مبنای رنگ باکتری پس ازرنگ آمیزی به دودسته گرم مثبت و گرم منفی تقسیم می‌شوند. رنگ باکتری پس ازرنگ آمیزی به توانایی حفظ رنگ اول وبه عبارتی به ساختمان دیواره سلولی باکتری بستگی دارد. دررنگ آمیزی گرم باکتری‌های گرم مثبت پس ازرنگ آمیزی به رنگ بنفش وباکتری‌های گرم منفی به رنگ قرمز مشاهده می‌شود. گرچه هر دو گروه یعنی باکتری‌های گرم مثبت و منفی دارای دیواره می‌باشند ولی فرق بین این دو گروه مربوط به خواصی است که در ساختمان دیواره سلولی آنها وجود دارد. اساس ساختمان در دیواره سلولی باکتری‌های گرم مثبت یک لایه ضخیمی‌است از پپتیدوگلیکان*[۱]، ولی در باکتری‌های گرم منفی ضخامت آن به حداقل می‌رسد.

فهرست مندرجات

[نهفتن]

۱ روش رنگ‌آمیزی گرم

۲ کاربرد رنگ آمیزی گرم

۳ جستار وابسته

۴ منابع

۵ پانویس

روش رنگ‌آمیزی گرم

پیش از آغاز رنگ آمیزی نخست باید یک فروتی از محیط کشت خالص باکتری بر روی لام تهیّه کنیم، در ادامه مراحل رنگ آمیزی گرم به قرار زیر هستند:

نخست رنگ کریستال ویوله رابه مدت ۳۰ تا ۴۵ ثانیه برروی فروتی باکتری روی لام می ریزیم، درنتیجه همه باکتری‌ها به رنگ بنفش درخواهد درآمد.

پس از شستشوی فروتی با آب، رنگ کریستال ویوله را با افزودن لوگول به مدّت ۳۰ تا ۴۵ ثانیه تثبیت می کنیم. لوگل باکریستال ویوله ترکیب شده وایجاد کمپلکس‌هایی می‌نمایید که باعث تثبیت رنگ کریستال ویوله درداخل دیواره سلولی باکتری می‌شود. پس ازاین مرحله، همه باکتریها کماکان به رنگ بنفش مشاهده می‌شوند .

مرحله رنگ زدایی:

مهم‌ترین مرحله رنگ آمیزی است. دراین مرحله پس از شستشو لام با آب لام به مدت ۱۵ تا۲۰ ثانیه در معرض موادرنگ زدا مانند الکل استون قرار می‌گیرد سپس با آب مورد شستشو قرار می‌گیرد. درباکتریهای گرم منفی که دارای لایه‌های پپتیدو گلیکان محدود وغشای خارجی غنی از چربی هستند این حلال باعث حذف این لایه‌ها وغشا می‌گردد وباکتری رنگ مراحل قبل راازدست می‌دهد. ولی درباکتریهای گرم مثبت به علت ضخامت زیاد لایه ی پپتیدوگلیکانی وعدم وجود لیپید فراوان در غشا رنگ مرحله قبل ازغشا خارج نمی‌شود .درنتیجه پس ازاین مرحله باکتریهای گرم منفی بی رنگ ولی باکتریهای گرم مثبت کماکان بنفش باقی خواهند ماند .

در انتها سطح فروتی راباسافرانین یا فوشین (قرمز رنگ) به مدت ۳۰ تا ۴۵ ثانیه می‌پوشانیم سپس باآب شستشو داده و پس از خشک شدن بامیکروسکوپ مورد بررسی قرار میگیرد. دراین مرحله باکتری‌های بی رنگ (باکتری های گرم منفی) به رنگ قرمز درمی‌آیند وباکتری‌های بنفش (باکتری های گرم مثبت) بدون تغییر رنگ باقی می‌مانند .

کاربرد رنگ آمیزی گرم

از رنگ امیزی گرم به دو جهت استفاده می شود:

شناسایی جنس باکتری

آنتخاب آنتی بیوتیک مناسب (باکتری های گرم مثبت در مقایسه با باکتری های گرم منفی نسبت به پنی سیلین G حسّاسیت بیشتری دارند)

با این حال همه یباکتری ها را نمی توان با رنگ امیزی گرم مشاهده نمود. فهرستی از باکتری های مهم از نظر پزشکی که با رنگ امیزی گرم قابل مشاهده نیستند در جدول زیر امده است.

باکتری های مهم از نظر پزشکی که با رنگ آمیزی گرم قابل مشاهده نیستند

نام باکتری

علّت عدم مشاهده باکتری با روش گرم

روش رنگ آمیزی جایگزین

1

مایکوباکتریوم ها شامل مایکوباکتریوم توبرکلوزیس

وجود مقدار زیادی چربی در دیواره سلولی که از نفوذ رنگ جلوگیری می کند

رنگ‌آمیزی اسید فاست

2

ترپونما پالیدوم

نازکتر از آن است که دیده شود

میکروسکوپ زمینه تاریک یا آنتی بادی فلوئورسنت

3

مایکوپلاسما پنومونیه

نبود دیواره سلولی

روشی وجود ندارد

4

لژیونلا پنومونیه

عدم دریافت رنگ قرمز

طولانی نمودن مرحله افزودن سافرانین در رنگ آمیزی گرم

5

کلامیدیا از جمله کلامیدیا تراکوماتیس

وجود ارگانیسم های درون سلولی، کوچکی سلول

6

ریکتزیا

وجود ارگانیسم های درون سلولی، کوچکی سلول

رنگ آمیزی گیمسا یا سایر رنگ آمیزی های بافتی

جستار وابسته

رنگ‌آمیزی اسید فاست

منابع

میکروب شناسی پزشکی جاوتز

میکروبیولوژی عمومی؛ دکتر فریدون ملکزاده، انتشارات دانشگاه تهران.

‎

Haward Hughes Medical Institute- 1999 Holiday Lecture on science CD-ROM